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微生物知识点(20)

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③染色:革兰染色阴性。姬姆萨染色呈紫色。抗酸染色(阳性改良 Ziehl-Neelsen、改良 Koster 等鉴别染色法)菌体红色,其他细菌呈现菌蓝色。可用以区别。

注意:这里不是革兰染色 后面分枝杆菌也是抗酸染色!!(常用齐尼二氏染色)

1.2 培养及生化特性

①呼吸类型:

此属细菌专性需氧 →之前都是兼性厌氧 之后分枝杆菌也是许多菌株,尤其是在初代分离培养时需 5%-10% CO2 气体环境。

②营养需求:

较高。普通培养基上生长缓慢,需加适量的血清,甘油或葡萄糖等泛酸钙和次藓糖醇可刺激生长。

③最适温度最适生长温度: 37℃,可在 25~42℃范围内生长。

④ 最适 pH:为 6.6~7.4。pH4.5 时不生长。

1.3 生长表现(培养时要在生物安全Ⅲ级)

①在液体培养基中 呈轻微浑浊生长,无菌膜。但培养日久,可形成菌环,有时形成厚的菌膜。

②在固体培养基上

(1)大多数菌株在初次培养时生长缓慢,48h 内罕见形成菌落,常需 5~10d 甚至更长的时间。

(2)长期传代菌株培养 48~72h 生长良好。

(3)S、R、M、I 菌落

(4)不溶血

光滑(S)型菌落:

无色透明、表面光滑湿润、有光泽、透光呈淡黄色及侧光呈现轻微乳色和略带蓝灰色,菌落大小不等。

粗糙(R)型菌落:

不太透明,呈多颗粒状,表面灰暗,颜色内无光泽白色、淡黄色或浅黄色到褐色。易碎或黏滞,不易从培养基表面刮净。

黏液(M)型菌落:

有时出现浑浊不透明、黏胶状菌落。

中间(I)型菌落:

在培养中出现菌落间的过渡类型。

1.4 生化反应

①大多数菌株能分解尿素和产生 H2S

②根据产生 H2S 的多少和对碱性染料抑制不同可鉴别牛羊猪等布氏杆菌。

1.5 抵抗力

①在自然界中抵抗力较强

在病畜的脏器和分泌物中,一般能存活 4 个月左右

在食品中约能生存 2 个月

对低温的抵抗力也强

②对热和消毒剂抵抗力弱

③对链霉素、氯霉素和四环素等均敏感

1.6 抗原性与变异

①布氏杆菌抗原结构非常复杂,目前可分为属内抗原与属外抗原。

②属内抗原包括 A、M 及 R 抗原等表面抗原。

③布氏杆菌最常见的变异为 S→R 变异

S 型菌株的抗原

①S 型布氏杆菌具有两种抗原成分

A 抗原(牛布氏杆菌主要抗原成分)

M 抗原(羊布氏杆菌主要抗原成分)

②两种抗原在各种菌中含量不同,牛布氏杆菌含 A 抗原多,含 M 抗原少。羊布氏杆菌含 M 抗原多,而含 A 抗原少。

③可利用凝集吸收试验制备出单因子血清

→单价 A 或 M 血清,供菌种鉴定之用

R 型菌株的抗原

①细菌细胞壁低蛋白含量的脂多糖复合物

②非光滑型布氏杆菌具有 R 表面抗原

是大多数粗糙型布氏杆菌的共同抗原

绵羊和犬种布氏杆菌是天然 R 型菌株

③布氏杆菌最常见的变异为 S 型→R 型变异,丧失 A 和 M 抗原,暴露出 R 抗原。

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